2.1 MEDIOS DE CULTIVO

2.1 MEDIOS DE CULTIVO

2.1 MEDIOS DE CULTIVO

Son medios nutritivos preparados para el crecimiento de microorganismo bajo condiciones estériles.

2.1.1 AREAS DEL LABORATORIO DE CULTIVO DE TEJIDOS

 El laboratorio de cultivo de tejido debe disponer de un are destinada al establecimiento, crecimiento y multiplicación de las plantas producidas; esta área es especialmente necesaria en los laboratorios de investigación y desarrollo y en los de producción comercial.

El laboratorio de cultivos de tejidos vegetales cuenta con diferentes áreas:

1.      Área de preparación: en esta área como su nombre lo indica se preparan los medios de cultivo. Este ambiente debe contar con mesas de trabajo para la preparación de los medios y para colocar las balanzas, el medidor de pH, los platos caliente con agitación, y otros elementos; también debe incluir vitrinas, estanterías y espacio para el equipo de refrigeración, y para la incubadora o la cámara de crecimiento.

2.      Área de lavado y esterilización: El área de lavado debe incluir por lo menos un lavadero grande con agua caliente y agua fría y una fuente de agua de alto grado de pureza, preferiblemente agua doblemente destilada, y también debe proveer basureros adecuados para el material vegetal, inorgánico y de vidrio que se deseche. El área de esterilización debe tener espacio para el autoclave vertical y horizontal, el cual puede ser pequeño (olla de presión) o grande (de carga frontal y de enfriamiento lento y rápido), según sea el volumen del material que se procese.

3.      Área de siembra, trasferencia o cámara de cultivo: se realiza el trabajo de escisión, inoculación y trasferencia de los espantes a los medios de cultivo, cuenta con campanas de flujo laminar y todos los accesorios necesarios para la inoculación.

4.      Área de crecimiento o incubación: Los cultivos se incuban en un cuarto apropiado o en gabinetes o cámaras de crecimiento; estas pueden ser más eficientes en cuanto al control ambiental, pero son más costosas.

5.      Área de rusticación, aclimatación o de endurecimiento: es el área de aclimatación en donde los cultivos deben de estar en condiciones ambientales favorables para su crecimiento.

MATERIAL VEGETAL

v  Plantas madres seleccionadas (pre-acondicionamiento).

v  Explantes (elección, disección, esterilización, etc.). Tejido vivo separado de su órgano propio y transferido a un medio artificial de crecimiento.

CONDICIONES DE CULTIVO

Ø  Asepsia: Es la ausencia de microorganismos que producen enfermedades.

Ø  Recipientes: se utilizaran los recipientes adecuados para cultivar y propagar los cultivos de tejidos vegetales.

Ø  Temperatura: Las temperaturas apropiadas para el cultivo varían desde 24 a 26°C. Algunas especies pueden tener una menor tolerancia o requerimientos específicos.

Ø  Luz y fotoperiodo: Las intensidades de luz usadas tanto para cultivo de semillas como para cultivo de meristemos o yemas van desde la oscuridad hasta los 300 Lux, generalmente obtenidos con fluorescentes y algunas veces complementados con lámparas incandescentes.